Фрагментация ДНК спермограммы (TUNEL-тест)

Разрывы в структуре ДНК сперматозоидов отрицательно сказываются не только на возможности зачатия естественным способом и жизнеспособности эмбриона на ранней стадии развития, но и на успешной реализации протоколов ЭКО/ИКСИ.У сперматозоида с существенными повреждениями генетических цепочек может сохраниться способность к оплодотворению. Но даже если это произошло, на стадии прикрепления к слизистой оболочке матки и образования бластоцисты развитие зародыша приостанавливается, возрастает риск замершей беременности и выкидышей на ранних сроках. С повреждениями цепочек ДНК связана вероятность онкологических заболеваний и генетических дефектов.

Повреждения хроматина сперматозоидов могут возникнуть на любой стадии сперматогенеза либо в процессе естественной гибели (апоптоза). Нарушения ДНК могут быть вызваны внешними и внутренними факторами.

К внутренним причинам относятся:

• сбой механизма отбраковки дефектных сперматозоидов;
• нарушение процесса созревания клетки.

К внешним факторам относятся:

• оксидативный стресс;
• курс лечения химио- и лучевой терапией;
• варикоз;
• длительное воздействие высоких температур;
• хронические заболевания воспалительного и инфекционного характера;
• воздействие токсинов, вредные привычки.

Разрывы цепочек в некоторых случаях могут наступить даже на стадии подготовки сперматозоидов к искусственному оплодотворению.

Спрогнозировать, каким именно сперматозоидом будет оплодотворена яйцеклетка, поврежденным или здоровым, невозможно, поэтому если степень фрагментации ДНК высока, неудача может подстерегать даже в случае применения методик ВРТ.

Стандартная спермограмма не отражает показателя фрагментированности ДНК. Для его определения используются качественно иные методы. Наиболее точные данные можно получить с помощью TUNEL-теста. Он отражает число фрагментированных клеток в эякуляте на текущий момент. В дальнейшем динамика может быть как положительной в результате правильно подобранных методов лечения и нормализации образа жизни, так и отрицательной вследствие резкого ухудшения общего состояния организма, изменения окружающей среды, злоупотребления алкоголем, табаком, наркотическими веществами и др. факторов.

Показания к назначению фрагментации ДНК методом TUNEL

Спермограмма Туннель — это инновационное исследование с максимально точными результатами.

TUNEL-анализ спермограммы назначается для исследования целостности генетической структуры и рекомендуется в следующих случаях:

• идиопатическое бесплодие;
• несколько безуспешных попыток применения методов ВРТ;
• неоднократные выкидыши на ранних сроках беременности;
• криоконсервация спермы;
• планирование беременности в зрелом возрасте.

Как проводится тест TUNEL

Исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом TUNEL основано на реакции сперматозоидов со специальным красящим веществом (энзимом). Дефектные клетки окрашиваются при использовании метода светлого поля или подсвечиваются зеленым при флуоресцентном методе. Индекс фрагментации вычисляется по соотношению дефектных и здоровых сперматозоидов.

Сперму для исследования рекомендуется сдавать строго в условиях клиники. Забор эякулята производится в стерильную посуду методом мастурбации и незамедлительно должен быть направлен на исследование. Условия подготовки к сдаче анализа стандартные, как и для обычной спермограммы.

Преимущества использования TUNEL-теста

Спермограмма, использующая метод Туннель, на сегодняшний день признана наиболее эффективным и авторитетным методом для установления индекса фрагментации сперматозоидов. Основное отличие TUNEL-теста от других методов состоит в фиксации реальных, а не предполагаемых повреждений, что и дает высокую прогностическую точность, используемую для выбора оптимальной методики ВРТ. Тест помогает выявить как одноцепочечные, так и двухцепочечные разрывы. В ходе исследования проводятся SCSA- и SCD-тесты на изучение структуры и дисперсии хроматина. С их помощью можно обнаружить патологические формы и структурные дефекты.

Расшифровка результатов теста TUNEL

Результат исследования оформляется в виде снимка, на котором зафиксированы фрагментированные сперматозоиды. Врачебное заключение содержит индекс фрагментации, показывающий процентное отношение здоровых клеток к общему числу и к референсным значениям.

Спермограмма Tunnel основывается на статистических данных, с помощью которых удалось установить пороговое значение  индекса разрыва в 15% поврежденных клеток, присутствующих в сперме здорового  мужчины. Чем выше этот показатель, тем ниже вероятность естественного зачатия:

• 15 –30% — зачатие возможно, хотя и затруднено;
• 30–50% — естественное зачатие маловероятно, но хорошие результаты прогнозируются для ЭКО;
• 50–60% — возможно только искусственное зачатие с невысокой степенью вероятности;
• более 60% — зачатие при помощи собственного семенного материала маловероятен.

Для улучшения качества спермы во всех случаях рекомендуют устранить причину, вызвавшую то или иное патологическое состояние. Хороший результат может дать изменение образа жизни: улучшение экологической обстановки, оздоровление организма, избавление от эмоциональных и физиологических стрессов, отказ от вредных привычек.

В некоторых случаях целесообразно провести обогащение образца семенной жидкости половыми клетками со здоровой генетикой при использовании методик ВРТ.

Андрологический подход основан на использовании в процедурах ВРТ наименее подверженных повреждениям тестикулярных клеток. В то же время при данной методике может возникнуть повреждение упаковки хроматина, поскольку полноценное созревание сперматозоидов с заменой гистонов на протамины происходит уже в придатках яичек. Для нейтрализации возможных негативных последствий активно применяются клеточные технологии с использованием клеток Сертоли.

В Москве существует немало организаций, в которых можно сдать необходимые анализы с достаточно широким разбросом цен. Но мы настоятельно советуем воспользоваться услугами сертифицированной лаборатории экспертного уровня, ведь от качества анализа во многом зависит правильное построение тактики лечения.

Узнать сколько стоит и что входит в исследование в нашей лаборатории можно на странице сайта или по телефону.